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這樣操作腫瘤解離試劑盒,即簡(jiǎn)單又快速

更新時(shí)間:2021-08-26 瀏覽次數(shù):735

  腫瘤解離試劑盒具有高效、快捷、易批量操作等優(yōu)點(diǎn),不同的廠家提供不同種類,不同類型的腫瘤解離試劑盒產(chǎn)品,為科研用戶帶來方便。
 
  實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作:
  1、準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等;
  2、確定試劑盒在有效期內(nèi);
  3、仔細(xì)閱讀說明書;
  4、按說明書確定所有試劑齊全;
  5、標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備,盡量分裝做備份;
  6、根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量;
  7、按說明書將所用試劑盒平衡至室溫,配制所需試劑。
 
  腫瘤解離試劑盒的操作步驟:
  1、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差;
  2、根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi);
  3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí);
  4、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次;
  5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘;
  6、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次;
  7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照;
  8、取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果;
  9、在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。
 
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